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新型冠状病毒实时多重RT-PCR试剂盒
起订量:10000设置
注：如果您有任何问题，请联系我们
- 1、可靠诊断：TGA批准；CFDA批准的第一个IVD，用于检测2019 nCoV RNA
- 2、PCR具有较高的敏感性和特异性，通过200多个自然临床标本验证
- 3、标本种类繁多：痰；鼻咽拭子；支气管肺泡灌洗；喉拭子
- 4、多重实时PCR；单管中2019冠状病毒疾病特异性靶基因（ORFlab、E、N）的检测和鉴定
- 实时RT-PCR试剂盒（2019 nCoV）
上海智杰生物科技有限公司
成立年份：
2005
产品描述
| 类别 | 品名 | Cat编号 | 规格 | 规格 |
| 检测套件 | 新型冠状病毒（2019 nCoV）实时多重RT-PCR试剂盒 | RR 0479-02 | 25项测试/套件 | 1/1TGA批准，第一个CFDA批准的套件；2/1单管检测3个靶基因 |
| 提取工具包 | RNA提取试剂盒 | ME 0044/0045 | 60/240测试/箱 | 预加载兼容EX3600，CE标记 |
| RNA提取试剂盒 | ME 0067/0068 | 80/320测试/箱 | 预加载兼容EX1600，CE标记 | |
| RNA提取试剂盒 | ME 0010/0025 | 50/25测试/箱 | 顺磁珠柱 | |
| 仪器仪表 | 自动化核酸；抽汽系统 | EX3600 | 36个样本/次 | 自动核酸提取，高效；防止交叉污染，20分钟/次 |
| 自动化核酸；抽汽系统 | EX 1600 | 16个样本/次 | 自动核酸提取，高效；防止交叉污染，20分钟/次 | |
| qPCR循环器 | 麦克风 | 48口井；6个频道 | 轻巧便携，快速准确；与汽车动力60分钟/次兼容 | |
| 自闭症 | AutraMic48 | 48次测试/运行 | 1/结果样本；2/HEPA密闭空间 | |
| 拭子 | OHC0381 | 100件/袋 | 用于喉拭子收集 | |
| 样本采集装置 | 痰液收集器/样本容器 | OHC0361 | 100管/袋 | 用于痰液收集，也可用作样本容器 |
| 病毒运输介质（VTM）/裂解缓冲液 | PR-0020 | 15管/袋 | 1/用于病毒灭活；2/防止RNA降解 | |
| 病毒运输介质（VTM）/裂解缓冲液 | PR-0021 | 15管/袋 | 1/痰液化；2/用于病毒灭活；3/防止RNA降解 |
新型冠状病毒（2019 nCoV）实时多重RT-PCR试剂盒（检测3个基因）
使用说明
1、预期用途
新型冠状病毒（2019 nCoV）实时多重RT-PCR试剂盒（检测3个基因）用于体外定性检测2019新型冠状病毒（2019 nCoV）RNA
实时PCR系统检测鼻咽拭子、口咽拭子和痰标本。它被认为是诊断2019年nCoV感染的一种辅助手段。
2、实时RT-PCR原理
实时检测的原理是基于荧光5'核酸酶分析。在PCR反应过程中，DNA聚合酶在5’端切割探针并分离报告染料
只有当探针与目标DNA杂交时，才能从淬火染料中分离出来。该切割导致被切割的报告染料产生荧光信号，该荧光信号由
PCR检测系统。最初检测到荧光信号增加的PCR周期（Ct）与特定PCR产物的量成正比。实时监测荧光强度允许检测累积产物，而无需在放大后重新打开反应管。
当起始材料为RNA时，使用实时逆转录聚合酶链反应（实时RT-PCR）。在这种方法中，RNA首先被转录到互补DNA中
（cDNA）通过总RNA的逆转录酶。然后将cDNA用作实时PCR的模板。
3、产品说明
冠状病毒是一大类病毒，有些可导致人类疾病，另一些可在骆驼、猫和蝙蝠等动物中传播。2019年nCoV是一种新型冠状病毒。该试剂盒包含一个特定的即用系统，用于通过实时RT-PCR检测新型冠状病毒（2019 nCoV）RNA。该反应在单管中进行一步实时RT-PCR分析。它包括用于将病毒RNA转录成cDNA的逆转录（RT）和用于扩增和检测cDNA的实时PCR。荧光在PCR期间由实时系统光学单元发射和测量。扩增病毒DNA片段的检测
在荧光计通道FAM、HEX/VIC和Cal Fluor Red610/TEXAS RED中执行。
4、套件内容
检测限（LoD）：200份/毫升；
注：LoD取决于样品体积、洗脱体积、核酸提取方法等
因素。如果使用推荐的RNA提取试剂盒，LoD与声明的相同。
但是，如果使用其他提取方法，则应进行额外验证，以确保分析的分析性能。
5、储存
•所有试剂应储存在-20±5°C的温度下。有效期为6个月。
•应在打开后1个月内使用分析。
•应避免重复解冻和冷冻（>3x），因为这可能会降低分析的敏感性。
•在工作步骤中冷却所有试剂。
•超级混合料应避光存放。
6、额外要求的材料和装置
•生物柜
•涡流混合器
•冷冻容器
•微型移液管的无菌过滤头
•一次性手套，无粉
•冰箱和冷冻柜
•实时PCR系统
•实时PCR反应管/板
•移液管（0.5μL–1000μL）
•无菌微管
•生物危害废物容器
•管架
•用于“eppendorf”型管的台式微型离心机（RCF最大16000 x g）
警告和注意事项在开始程序之前，请仔细阅读本使用说明。
•该分析需要由熟练人员进行。
•临床样本应视为潜在感染性材料，并在层流罩中制备。
•该分析需要根据良好的实验室实践进行。
•试剂盒过期后请勿使用。
•避免试剂反复解冻和冷冻，因为这可能会降低测试的敏感性。
•试剂解冻后，在使用前对试管进行旋涡和离心分离。
•在冰上或冷却块中快速制备反应混合物。
•设置单独的工作区：1）反应设置，2）RNA分离，3）
扩增产物的扩增/检测。
•移液管、小瓶和其他工作材料不得在工作装置之间循环。
•始终使用带过滤器的无菌吸管头。
•在每个区域穿戴单独的外套和手套。
•根据当地安全法规丢弃样品和化验废物。
•不要用嘴吸管。请勿在实验室内进食、饮水或吸烟。
•避免气溶胶
8、样品采集、储存和运输
•在无菌试管中收集样本；
•试样可立即提取，或在24小时内储存在2°C~8°C的温度下，或在-70°C的温度下长期冷冻。
•临床标本的运输必须符合
病原体
9、程序
9.1 RNA提取
可提供不同品牌的RNA提取试剂盒。您可以使用自己的提取系统或
基于产量的商业套件。对于RNA提取，请遵循制造商的
说明书推荐的萃取套件如下：
值得注意的是，该试剂盒中的阴性对照和阳性对照应采用与标本相同的方法提取。
9.2内部控制
该试剂盒中的内部控制（IC）应添加到萃取混合物中，每试验1μL，以监测整个过程。
9.3 RT-PCR方案
每个反应的主混合物体积应按如下方式移液：
1） 每个反应的超级混合物和酶混合物的体积乘以
样品，包括对照品和制备样品的数量。原因：
不精确的移液，始终添加额外的虚拟样品。完全混合，然后向下旋转
使用离心机进行简单操作。
2） 将20μL主混合物和无菌滤嘴的微量移液管移到每个实时PCR中
反应板/管。分别加入5μL模板（从阴性细胞中提取核酸
对照组、阳性对照组和试样）到不同的反应板/管。立即关闭
避免污染的板/管。
3） 快速向下旋转，以收集反应管底部的主混合物和模板。
4） 在ABI Prism®7500仪器中执行以下协议；Bio-Rad CFX96；俚语：
5） 如果您使用ABI Prism®系统，请选择“无”作为被动参考和猝灭器。
10、阈值设置：刚好高于阴性对照的最大水平。
11、质量控制：必须正确进行阴性对照和阳性对照；否则
示例结果无效。
12、数据分析与解释
下表列出了新型冠状病毒（2019 nCoV）的实时预期结果
多重RT-PCR试剂盒（检测3个基因）。如果获得的结果不符合这些指南，
联系Liferiver咨询。
注：
[a] 实验室应酌情报告其诊断结果，并符合其
具体报告制度。
[b] 2019年NCOVH引起的感染期间病毒水平峰值的最佳标本类型和时间尚未确定。可能需要从同一患者身上采集多个标本来检测病毒。
[c] 如果至少有两个ORF1ab、N和E基因的结果为阳性，则样本为2019 nCoV
积极乐观的如果这三个基因均为阴性，则样本为2019 nCoV阴性；如果结果是
ORF1ab或N基因阳性，样本2019 nCoV阳性；如果结果仍然仅对egene呈阳性，则样本为2019 nCoV阳性或其他近源冠状病毒阳性（一旦排除SARS病毒和非人类样本，则可报告为2019 nCoV阳性）。
有关更多问题，请联系我们的技术支持info@liferiverbiotech.com
